目的：建立一种基于国产莱特LF200倒置荧光显微镜的CCK-8细胞活力检测方法，将酶标仪比色定量与显微镜原位形态学观察相结合，验证该方法在药物细胞毒性评价中的可靠性与应用价值。方法：以HepG2人肝癌细胞为模型，采用96孔板培养体系，设置顺铂浓度梯度（0、1、5、10、25、50、100 μmol/L）处理24 h。CCK-8法测定450 nm吸光度值计算细胞存活率；同时使用LF200倒置荧光显微镜在明场、相差及荧光模式下对各孔细胞进行原位成像，记录细胞形态变化，并以AO-PI荧光复染验证活死细胞比例。结果：LF200相差模式可清晰呈现细胞贴壁状态、细胞核轮廓及凋亡小体等形态学特征；AO-PI荧光复染结果与CCK-8 OD值呈良好的线性相关（R²=0.973）。该方法可有效识别酶标仪单一数值无法反映的细胞聚集、碎片增多及漂浮死亡等形态学异常。结论：基于LF200倒置荧光显微镜的CCK-8联合检测方法实现了定量与定性的有机结合，为药物筛选和细胞毒性评价提供了更全面、更可靠的实验依据，具有良好的推广应用价值。